使用
透析袋可先用50%乙醇煮沸1小時,再依次用50%乙醇、0.01mol/L碳酸氫鈉和0.001mol/LEDTA溶液洗滌,用蒸餾水沖洗即可使用。實驗證明,50%乙醇處理對除去具有紫外吸收的雜質(zhì)特別有效。(也可先在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和1mmol/LEDTA(pH8.0)中,將透析袋煮沸10分鐘,用蒸餾水*清洗后,再放在1mmol/LEDTA(pH8.0)中將之煮沸10分鐘。)
新的透析袋如不作如上的特殊處理,則可用沸水煮五至十分鐘,再用蒸餾水洗凈,即可使用。使用時一端用橡皮筋或線繩扎緊,也可以使用特制的透析袋夾夾緊,由另一端灌滿水,用手指稍加壓,檢查不漏,方可裝入待透析液,通常要留三分之一至一半的空間,以防透析過程中,透析的小分子量較大時,袋外的水和緩沖液過量進入袋內(nèi)將袋漲破。含鹽量很高的蛋白質(zhì)溶液透析過夜時,體積增加50%是正常的。為了加快透析速度,除多次更換透析液外,還可使用磁子攪拌。透析的容器要大一些,可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶。小量體積溶液的透析,可在袋內(nèi)放一截兩頭燒園的玻璃棒或兩端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。
使用后的透析袋洗凈后可存于4℃蒸餾水中,確保透析袋始終浸沒在溶液內(nèi)。若長時間不用,可加少量NaN2,以防長菌。從此時起取用透析袋必須戴手套。洗凈涼干的透析袋彎折時易裂口,用時必須仔細檢查,不漏時方可重復(fù)使用。在保持之前需用生理鹽水浸泡以去掉蛋白,并用蒸餾水清洗干凈,然后置50%乙醇中保存即可;用完以后,要*洗干凈,透析袋也可以保存在0.1%疊氮鈉(可防止微生物生長)里;0.05%-0.1%疊氮鈉,或者1mMEDTA,或者50%甘油中4度保存。